Alyssa Ashcroft est née en 1970 aux États-Unis. Journaliste d'investigation pour le Raccoon Press, elle commence à enquêter sur les activités d'Umbrella dès 1993, cinq ans avant que les S.T.A.R.S. ne découvrent le laboratoire du manoir Spencer. Elle apprend qu'une entreprise soudoie un hôpital pour tester des médicaments sur des patients et se rend sur place avec son collègue Kurt. Ce dernier est partiellement dévoré par Dorothy Lester, infectée par une souche du T-Virus. Pour empêcher Alyssa de révéler cet incident, un chercheur d'Umbrella efface ses souvenirs par une procédure de suppression mémorielle, la privant de preuves cruciales qui auraient pu exposer la société des années avant l'épidémie.
Le 23 septembre 1998, alors que l'épidémie de T-Virus atteint un point critique, Alyssa se trouve au J's Bar avec d'autres habitants lorsque les premiers zombies attaquent. Au cours de l'incident, elle est elle-même infectée par le virus Epsilon via l'eau contaminée de la ville. Malgré cela, elle survit à de multiples situations périlleuses à travers Raccoon City, retrouve l'hôpital abandonné des monts Arklay où ses souvenirs refont surface, et parvient à s'échapper de la ville avant sa destruction par missile thermobarique. Après Raccoon City, Alyssa continue d'écrire des articles pour exposer Umbrella et les armes biologiques, y compris un article en 2016 dans le Dulvey Daily sur des disparitions mystérieuses en Louisiane, prémices de l'incident de la famille Baker dans Resident Evil 7.
Alyssa fonde une famille et devient la mère adoptive de Grace. En 2018, ses enquêtes la mènent à l'hôtel Wrenwood où elle découvre les activités clandestines de Victor Gideon au Rhodes Hill Chronic Care Center. Gideon, se sentant menacé, organise son assassinat. Alyssa se rend à l'hôtel accompagnée de sa fille Grace. Après un appel mystérieux et une coupure de courant, un individu cagoulé tue le gérant de l'hôtel puis assassine Alyssa sous les yeux de Grace. Huit ans plus tard, son meurtre non résolu et l'héritage de ses enquêtes deviennent le moteur de l'intrigue de Resident Evil Requiem, faisant d'Alyssa le fil conducteur entre l'ère Outbreak et la nouvelle génération de la franchise.
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